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顾名思义，荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗，这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。常见的荧光团包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即异硫氰酸荧光素，是目前应用最广泛的荧光素。最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为 520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。其优势是分子量较小为389.4，每一个抗体可标记几个FITC分子，而且人眼对黄绿色较为敏感，因此具有很好的对比度其缺点是淬灭快。罗丹明（Rhodamin）及其衍生物则是一群带黄红色荧光的荧光素，包括TRITC、Texas Red等。罗丹明及其衍生物与FITC的绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色，但是其荧光强度偏弱，其中Rhodamin比Texas Red荧光又要偏弱。蚂蚁淘能为客户提供全系列的各种原装进口荧光二抗，包括Jackson的大包装粉末形式的荧光二抗，另外，也提供EarthOx的小包装液体形式荧光二抗，均具有很高的性价比。






花箐素Cy是另一类荧光团，包括绿色的Cy2、黄红色的Cy3、红色的Cy5、近红外的Cy5.5等荧光染料，由于结构的稍微区别，其吸收和发射波长也有所区别。比如Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。Cy2和FITC使用相同的滤波片，但是要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。下面我们看一组荧光二抗的比照图片。



























我们知道，FITC的绿色荧光强度肉眼观察已经很亮了，但是从左上面的图可见，与Cy2相比还是偏弱，而Dylight 488则更胜一筹；右上图是不同荧光团在含有90%甘油的PBS里的荧光淬灭情况，由图可见。FITC的淬灭都很快，Cy2其次，而Dylight
488和Alexa 488都具有很好的光稳定性。下面再看另一组有关于红色荧光的数据：









由左上图可见，Dylight
594比Alexa 594和Texas Red的荧光强度都要强，Dylight 594的特异性也很好；同样，右上图显示Dylight 594的光稳定性也很优异。那么Dylight到底是一种什么样的荧光团？不管在结构以及功能和应用上，Dylight都是一种新的荧光团，与传统的荧光团相比，其分子量相对较小，因此一个大分子上可以标记更多的Dylight，同时单个的Dylight荧光团，其荧光强度更强，特异性更好；Dylight对光更稳定，这意味着其具有更高的抗淬灭性，不像FITC因为快速发生淬灭而无法及时捕捉到荧光图像。Dylight还有一个优势是种类很全，比如做三标的时候，除了常见的红色和绿色荧光，蓝色荧光应该是第三选择，Dylight 405就是蓝色的。Dylight 488是绿色的，可完全替代FITC；完全替代Cy3和Rhodamin的Dylight
549；替代Texas Red的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649则是更强的红色荧光；另外，Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗，分别是Dylight
680和Dylight 800。


可能还需要考虑的一个问题是价格的问题，其实Dylight的荧光二抗与常规荧光二抗相比，具有更高的性价比，一般来说，Dylight的价格比常规二抗只高20%左右，但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右，因此就最终的性价比，Dylight更胜一筹。举例来说，EarthOx的FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E031210），100μl是￥160；而相应的EarthOx的Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E032210），100μl报价是￥240，但是在具体使用时，比如免疫荧光实验，其推荐稀释比率分别为1:100和1:400，即100μl的FITC标记山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E031210）最终使用液是10ml，而100μl的Dylight 488标记山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E032210）最终使用液是40ml，可见，即使不考虑Dylight更高的荧光强度、更好的光学稳定性和特异性，但就价格来说，Dylight荧光二抗也具有更高的性价比。

送TA礼物 回复1楼2013-06-25 13:21
该楼层疑似违规已被系统折叠隐藏此楼查看此楼 美国Abbkine的DyLight™系列荧 光标记是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）、对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，越来越受到科研客户的喜爱。DyLight™种类齐全，如Dylight 405是蓝色荧光，替代Alexa 405；DyLight 549是绿色荧光，可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488；完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549；替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649（可替代Cy5/Alexa 647）则是更强的红色荧光；另外，Dylight荧光还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我们来看看美国Abbkine品牌DyLight系列荧光的优异表现吧：

一、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更高的荧光发光强度

DyLight 488标记的抗体比Cy2 和FITC标记的更亮，与Alexa Fluor 488 标记的亮度相当。DyLight 549标记的抗体比传统的罗丹明、TRITC等荧光亮，与Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相当；而DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。相比较Texas Red而言，不仅更亮，而且具有更好的水溶性。

二、DyLight荧光二抗比传统荧光及Alexa标记二抗具有更低的背景！


左上图为使用 FACSCalibur流式细胞仪（Becton Dickinson），分析抗-CD3和其他荧光素标记的人外周血淋巴细胞图谱。不同颜色分别指示DyLight 488 （绿色）、FITC （黄色）、Cy2 （蓝色）以及Alexa Fluor 488（红色）标记的荧光二抗。箭头所指处显示Alexa Fluor 488在这个实验中有轻微的背景。右上图为在流式分析中，以抗-CD3和各种荧光素连接二抗标记的人外周血淋巴细胞图谱。绿色为DyLight 649、黄色为APC、蓝色为Cy5 标记的二抗。Alexa Fluor 647为红色区域。箭头所指处显示Alexa Fluor 647在这个实验中有轻微的背景。

三、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更好的光学稳定性、发光更持久、更适合拍照



从光稳定性上来说，DyLight 488与Alexa 488均表现优异，均强于FITC和Cy2；DyLight 549与Alexa 555具有相当的耐光性，稍微比Cy3强。在封片剂中加入抗淬灭剂如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加这三种荧光染料的耐光性；在可见光谱的橙-红区域内，DyLight 549和Cy3标记的二抗在所有免疫荧光实验中表现出最大灵敏度。DyLight 594在不含有抗淬灭剂的条件下，远较Texas Red稳定，与Alexa594相当；在含有某些抗淬灭剂的情况下，DyLight 594同样表现优异。

四、DyLight荧光二抗种类更多更全





从蓝色的DyLight 405、绿色的DyLight 488、黄色的DyLight 549、橙色的DyLight 594到红色的DyLight 633和DyLight 649等最常用的荧光颜色，激发光和发射光光谱分布合理，适用于各种荧光分析。其中蓝色荧光的DyLight 405适合用于绿色和红色以外的三标实验。

另外，还有两种远红外DyLight标记抗体，具有更低的荧光背景干扰和更强的样本穿透力，因而更适用于细胞或组织的成像等领域的研究。蚂蚁淘提供的进口DyLight抗体产品覆盖各种动物种属，包括人、小鼠、兔、大鼠等，另有3种标记的链亲和素。

五、DyLight荧光二抗具有最高的性价比！

可能还需要考虑的一个问题是价格的问题，其实Dylight荧光二抗与常规荧光二抗相比，具有更高的性价比，一般来说，Dylight的价格比常规二抗只高20%左右，但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右，因此就最终的性价比，Dylight更胜一筹。举例来说，Abbkine的 FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为A22110），100μl是￥160；而相应的Abbkine的Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为A23210），100μl报价是￥240，但是在具体使用时，比如免疫荧光实验，其推荐稀释比率分别为 1:100和1:400，即100μl的FITC标记山羊抗小鼠IgG二抗（货号为A22110）最终使用液是10ml，而100μl的Dylight 488标记山羊抗小鼠IgG二抗（货号为A23210）最终使用液是40ml，可见，即使不考虑Dylight更高的荧光强度、更好的光学稳定性和特异性，但就价格来说，Dylight二抗也具有更高的性价比。

我们向您推荐美国Abbkine原装进口的液体形式的小包装常用DyLight系列二抗产品
小包装Abbkine的DyLight荧光二抗。均提供100μl和500μl两种包装现货产品。Abbkine是美国专业生产免疫试剂并提供细胞学研究解决方案的公司，其产品主要销往到全球的的大学、科研院所等研究机构。其中Abbkine为您提供 最常用的DyLight 549荧光标记二抗产品：


抗体描述货号|荧光标记 DyLight 405 DyLight 488 DyLight 549 DyLight 594 DyLight 649
400nm/421nm 493nm/518nm 555nm/568nm 591nm/616nm 652nm/670nm
Goat Anti-Mouse IgG （H+L） A23110 A23210 A23310 A23410 A23610
Goat Anti-Rabbit IgG （H+L） A23120 A23220 A23320 A23420 A23620
Rabbit Anti-Goat IgG （H+L） A23130 A23230 A23330 A23430 A23630
Goat Anti-Rat IgG （H+L） A23140 A23240 A23340 A23440 A23640
Goat Anti-Human IgG(H+L) A23150 A23250 A23350 A23450 A23650
注：每种规格均提供100μl和500μl，2013年报价分别为￥240/￥960，最新报价请使用货号在网站内查询。

回复收起回复2楼2017-07-26 15:41 扫二维码下载贴吧客户端下载贴吧APP
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